产品货号：
JN0068
中文名称：
热敏性磷酸酶(HSP)
英文名称：
Heat sensitive phosphatase
产品规格：
200U
发货周期：
1～3天
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本制品由南极嗜冷菌株TAB5中分离的磷酸酶基因在大肠杆菌中进行表达后经多次纯化分离而得。磷酸酶能催化除去DNA或RNA末端的5′磷酸基团。在克隆时将载体DNA用热敏性磷酸酶处理后其片段缺少连接酶所必须的5′磷酸末端，因此载体不能进行自连接，可以大大降低载体自连的背景。该酶可以作用于5′突出末端、凹陷端和平末端。
- 除去载体5′末端的磷酸基团，减少自连背景；
- 去除PCR产物中残留的dNTP和焦磷酸盐；
- 除去DNA探针5′末端的磷酸基团，为5′末端磷酸化标记准备最适底物；
- 蛋白质的去磷酸化。
在37℃、30分钟条件下，能使1μg经Hind III(产生5′突出末端)、EcoR V (产生平滑末端)或Pst I(产生5′凹进末端)消化的pUC19 DNA去磷酸化所需的酶量定义为一个单位。
- 去磷酸化标准是指：在连接反应中能抑制>95%的DNA片段再连接（通过电泳来检测）。
| 组分 | 规格 |
| 热敏性磷酸酶(5U/μL) | 40μL |
| 10×HSP Reaction Buffer | 1mL |
保存：-20℃
1×HSP Reaction Buffer：
50mM Bis Tris-丙烷HCl，1mM MgCl2，0.1mM ZnCl2，pH6.0@25℃。
70℃加热5分钟。
经多次柱纯化，SDS-PAGE胶检测仅可见清晰单一的目的条带；PCR方法检测无大肠杆菌DNA残留，无核酸内、外切酶污染。
热敏性磷酸酶在1×HSP Buffer中有最适酶活力。如果要在限制性酶切Buffer中进行反应，必须在反应体系中添加10×HSP Buffer至1×终浓度，37℃温育。
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